teknova培養基的安全使用秘籍
發布日期:2025-09-22 點擊:21
以下是關于teknova培養基的安全使用秘籍,涵蓋配制、滅菌、儲存、操作等關鍵環節的注意事項和規范流程:
1.精準配制與溶解
嚴格按配方稱量:配料時需逐一加入藥品并充分攪拌溶解,尤其注意淀粉類成分應先用少量冷水調成糊狀后再加熱溶解;含瓊脂的培養基必須煮沸以確保全融化,同時邊加熱邊攪拌防止燒焦。
pH值調節:使用1N鹽酸或NaOH溶液調整至目標范圍,這是微生物生長的關鍵參數,直接影響檢驗結果的準確性。
過濾澄清(可選):通過濾紙或棉花去除雜質,提升培養基純凈度。
2.teknova培養基科學分裝與密封
容器選擇與容量控制:靜置培養時,每250mL三角瓶不超過100mL培養基以避免滅菌時沸騰污染棉塞;搖瓶培養則建議15–20mL/瓶以保證通氣性。試管分裝時,液體培養基占試管高度的1/4,固體斜面約為1/5。
包扎防護:分裝后立即用棉塞封口,并以牛皮紙包裹防潮,確保滅菌過程中水分不滲入導致污染。
3.滅菌工藝優化
高壓蒸汽滅菌參數管控:嚴格按照配方要求的溫度和壓力進行滅菌,避免過高溫度破壞營養成分(如糖分焦化、氨基酸變色)。滅菌后趁熱擺放試管斜面,使其凝固成合適角度供后續接種使用。
現配現滅原則:未滅菌的培養基不可長時間放置,必須及時處理并盡快使用,防止微生物滋生。
4.規范化儲存管理
低溫避光保存:未開封的培養基于2–8℃冷藏,避免冷凍導致瓊脂破裂或成分沉淀;已開封的應密封后盡快用完,減少反復溫變帶來的風險。光敏感型培養基需額外避光處理以防止有效成分降解。
有效期監控:定期檢查保質期及物理狀態(如顏色、透明度),過期或異常(如渾濁、干裂)的培養基嚴禁使用。
5.teknova培養基無菌操作與環境控制
生物安全柜內作業:實驗前開啟紫外燈照射30分鐘消毒,隨后啟動風機和照明,用消毒劑擦拭臺面并等待5分鐘凈化空氣。操作時雙臂緩慢進入柜內,保持離前窗10cm以上距離,廢棄物及時放入專用容器。
減少污染概率:集中完成樣品檢測,避免頻繁開蓋;傾倒培養基時控制溫度在45℃左右,既防止高溫燙死目標菌又避免低溫凝固影響鋪板效果。
6.使用前的驗證與測試
空白對照實驗:每批新配培養基均需做空白試驗,確認無雜菌生長。對于關鍵類型(如血瓊脂),可通過接種標準菌株驗證溶血性等功能特性;選擇性培養基則需測試目標菌的顯色反應是否符合預期。
外觀質檢:使用前觀察平板是否光滑均勻、液體是否澄清無沉淀,異常情況(如變色、氣泡增多)可能提示污染或失效。
7.配套工具與樣本處理
器具滅菌標準化:玻璃器皿采用干熱滅菌法,金屬工具(如接種環)通過灼燒冷卻后使用。取樣器具需預先用75%酒精消毒,避免接觸瓶口造成交叉污染。
樣品代表性采集:遵循隨機抽樣原則,準確記錄稀釋倍數和計量體積,確保檢測結果能真實反映樣本狀況。
8.teknova培養基過程監控與異常應對
培養條件動態跟蹤:在恒溫培養箱中實時監測溫度波動,按《微生物檢驗規范》定時觀察菌落形態及生長速度,發現異常立即分析原因并反饋。
應急措施準備:若懷疑污染發生,可取少量培養液接種于營養瓊脂平板進行48小時驗證,同時檢查高壓滅菌設備的有效性及過濾系統的完整性。
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